关于印发《SARS病毒灭活疫苗临床前研究技术要点》等技术要求的通知

作者:法律资料网时间:2024-06-24 21:29:26 浏览:9868 来源:法律资料网

关于印发《SARS病毒灭活疫苗临床前研究技术要点》等技术要求的通知

国家食品药品监督管理局

关于印发《SARS病毒灭活疫苗临床前研究技术要点》等技术要求的通知

国食药监注[2003]128号

各省、自治区、直辖市药品监督管理局：

　　为加强SARS诊断试剂、疫苗以及防治药物筛选研发工作的管理，规范技术研究及实验方法，确保研究结果真实可靠，我局组织制定了《SARS病毒灭活疫苗临床前研究技术要点》、《细胞模型筛选抗SARS病毒药物试验技术要求》、《SARS诊断试剂生产研制技术要求》及《SARS病毒毒株资料登记表》等技术要求，现予印发，请从事SARS防治药物研发的单位遵照执行，并就相关问题通知如下：

　　一、从事SARS疫苗研究、诊断试剂研制和有关药物筛选等工作的单位，在执行相关技术要求的同时，必须严格按照科学技术部、卫生部、国家食品药品监督管理局和国家环境保护总局四部局联合颁发的《关于印发〈传染性非典型肺炎病毒实验室暂行管理办法〉和〈传染性非典型肺炎病毒的毒种保存、使用和感染动物模型的暂行管理办法〉的通知》（国科发农社字〔2003〕129号）要求保存和使用SARS病毒毒株，任何单位不得擅自进行毒株的转让。因SARS 病
毒毒株保存或者使用不当引起严重后果者，将承担相应的法律责任。

　　二、各药物研究开发单位应按照《SARS病毒毒株资料登记表》的要求整理有关毒株的详细资料，于2003年7月31日前报中国药品生物制品检定所（北京天坛西里2号，邮编100050；联系人：董关木；联系电话：010-67058428）。未按规定要求提交SARS病毒毒株资料的，国家食品药品监督管理局将不受理其研发制品的注册申报和审批。

　　三、中国药品生物制品检定所接到各单位报送的SARS病毒毒株资料后，应及时审核并将审核意见和进行药物研究用毒种的基本情况，书面报国家食品药品监督管理局。

　　四、请各省、自治区、直辖市药品监督管理局尽快将本通知转发至辖区内从事SARS防治药物研究开发单位。

　　特此通知

　　附件：1．SARS病毒灭活疫苗临床前研究技术要点
　　　　　2．细胞模型筛选抗SARS病毒药物试验技术要求
　　　　　3．SARS诊断试剂生产研制技术要求
　　　　　4．SARS病毒毒株资料登记表

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　国家食品药品监督管理局
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　二○○三年七月一日

附件1：

　　　　　　　　　　　　SARS病毒灭活疫苗临床前研究技术要点

　　随着对非典型肺炎的病原学、流行病学、诊断和治疗等学科进行全面深入的研究，在各领域已取得重要进展，尤其是确定了SARS病毒为其病原体，已成功分离到多株SARS病毒，并已验证其能在Vero细胞和2BS等细胞系中培养增殖，这为研制疫苗提供了基础和基本条件。但是由于SARS病毒的研究有待进一步深入，疫苗的研制尚存在很多的不确定因素。为使SARS病毒灭活疫苗的临床前研究工作科学规范，特制定SARS病毒灭活疫苗临床前研究考虑要点。

　　一、毒种
　　研究本疫苗所用的毒种须证明为SARS病毒，如该毒种分离自人体，须提供以下资料

（一）病毒株名称及来源
　　1．名称
　　2．宿主情况：
　　（1）病人姓名、年龄、性别、民族、家庭住址；
　　（2）发病地点、发病日期；
　　（3）收住入院日期、临床确诊日期、实验室确诊日期；
　　（4）病人病程及病人转归：死亡、痊愈、是否有后遗症；
　　（5）毒株分离原样本：
　　咽试子、漱口液、痰液、血液、粪便或尸解标本组织名称；
　　（6）取样日期；
　　（7）取样时病人的病期；
　　（8）取样地点；
　　（9）病人是否留有恢复期血清；
　　如有：采血日期（病期）和血清量；
　　鉴于人类咽试子、漱口液、痰液、粪便等样品难免污染其他外原因子，因此建议尽可能采用病人血液分离的病毒株。

　　（二）毒株分离过程
　　1．用细胞分离病毒，须提供所用细胞名称、代次、来源和细胞无菌检测、外原因子检测等资料；鉴于Vero E6细胞的生物学特性，用Vero E6细胞分离的SARS病毒不能直接用于疫苗生产用毒种，须将Vero E6细胞的适应株重新转适应到Vero细胞或二倍体细胞株的毒种方能用于生产，因此建议尽可能使用直接以Vero细胞或二倍体细胞株分离的毒种。
　　2．通过动物分离病毒，须提供所用动物名称、动物品系、动物级别、动物年龄和制备毒种的动物脏器名称等资料；如再适应到细胞，则还须提供1．项中的6所述的细胞资料。

　　（三）病毒分离传代特性
　　样品处理方法、首次盲传确证病毒阳性代次、病毒确证检定方法、每代培养天数、病毒滴度、滴定方法、动物是否发病或死亡等资料。

　　（四）毒种建立和保存
　　原始毒种代次、毒种病毒滴度、毒种添加的保护剂的名称和浓度、毒种存储条件。
　　毒种批的建立应按《中国生物制品规程》疫苗毒种要求进行，应建立原始毒种、主毒种和工作毒种批三级毒种库，主种子和工作种子批还须有毒种的限定代次的资料，以证明主种子和工作种子批在规定代次内的生物学特性与原始毒种一致。

　　（五）毒种的检定
　　1．毒种的鉴别试验：
　　应提供检定方法、检定日期、检定结果等资料，建议采用下述方法进行鉴别试验：
　　（1）可使用确诊为SARS病人的恢复期高效价血清中和病毒。
　　（2）测定中和前后的病毒滴度。
　　（3）应有病毒株的核酸全序列分析的资料，包括序列测定的方案、测定方法和测定结果，测定结果应附核酸序列图、推导的氨基酸序列图、种系发生树图等以进一步证明为SARS冠状病毒。

　　2．毒种的无菌试验
　　应根据《中国生物制品规程》疫苗生产用毒种的要求进行无菌试验检查。

　　3．毒种的外源因子检查
　　应用证明为SARS病毒感染的单人份病人血清中和本病毒。完全中和病毒后（如不能一次中和，可用另一病人血清再一次中和后）按下列方法进行动物和细胞检查。
　　（1）动物试验法
　　小鼠
　　取15-20g小鼠至少10只，用经中和后的病毒悬液，每只脑内接种0．03ml，腹腔接种0．5ml。至少观察21天。解剖所有在试验24小时后死亡或有患病体征的小鼠，为了检查病毒感染的证据，直接肉眼观察其病理改变，并将有病变的相应的组织悬液通过脑内和腹腔接种另外至少5只小鼠并观察21天。如果没有小鼠表现出病毒感染现象，则病毒种子符合要求。在观察期内至少有80%最初接种的小鼠存活试验才有效。
　　乳鼠
　　出生后24小时以内的乳鼠，至少10只，用经中和后的病毒悬液，脑内接种0．01ml，腹腔接种至少0．1ml。每天观察，至少14天。解剖所有在试验24小时后死亡或有患病体征的小鼠，直接肉眼观察其病理改变，并取有病变的相应的组织和脑、脾制备成悬液脑内和腹腔接种另外至少5只小鼠并每天观察，观察14天。如果没有小鼠表现出有病毒感染现象，该病毒种子通过试验。在观察期内至少有80%最初接种的小鼠存活试验才有效。
　　（2）细胞培养法
　　·非血吸附病毒检查
　　中和后的病毒悬液，还应分别接种于人源、猴源和生产用的同种不同批的细胞。如果是利用人二倍体细胞生产的，还应接种另外一株人二倍体细胞。每种细胞最少接种6瓶，每瓶病毒悬液接种量不少于培养液总量的25%。于36±1℃培养，观察二周，或最后一次收获病毒液时间检查是否有CPE出现。未见CPE为阴性。
　　·血吸附病毒检查
　　于第6-8天和第14天，每种细胞分别各取出2瓶进行血吸附，一瓶放置2-8℃，一瓶放置20-25℃，30分钟后显微镜下观察，未见血球吸附现象为阴性。
　　特别注意：鉴于我国实验室条件和所用细胞的不确定因素，用于分离病毒的细胞常常污染支原体，而细胞和病毒一旦污染支原体很难清除，为此，提醒对使用的毒种须高度重视，彻底查清毒种是否确已污染支原体，以免所选毒种不符合生产疫苗用毒种，浪费人力、物力、时间和资源。

　　4．毒种的病毒滴度
　　鉴于目前的研究资料显示，SARS病毒在Vero细胞中的复制滴度一般可达108，在二倍体细胞中为106左右，用于疫苗研究的毒种应分别达到上述要求。

　　5．毒种免疫原性检查
　　鉴于目前尚无测定疫苗免疫原性的有效方法和标准，建议以实验性灭活疫苗（即用已建立的毒种库制备的灭活病毒液）单次或多次免疫动物后采血清测定中和抗体滴度，测定方法应为蚀斑形成减少法或细胞病变抑制法，可能时应对所测抗体的种类进行分析。用于中和抗体测定的病毒株应为非同源株，免疫用动物可考虑家兔、小鼠、豚鼠或其他敏感动物。如有条件时也可测定疫苗的ED50

　　6．疫苗候选株病毒的纯化问题
　　新分离的病毒往往是群体病毒毒种，难免存在不同特性的病毒，如毒种病毒滴度和免疫原性未达要求，必要时可考虑用终末稀释法或蚀斑形成法挑斑反复多次纯化。灭活疫苗的研制，如毒种病毒滴度和免疫原性能达到基本要求，可用现有毒种直接制备实验性疫苗，无须纯化。

　　7．毒种的其他检定
　　按《中国生物制品规程》疫苗生产用毒种的要求进行

　　二、疫苗生产用细胞
　　鉴于目前SARS病毒对各种细胞的敏感性研究，以Vero E6细胞最好，Vero细胞和二倍体细胞次之。但Vero E6细胞不能用于生产，可选择Vero细胞、和/或二倍体细胞进行研究。

　　Vero细胞、二倍体细胞均为传代细胞，因此须建立三级细胞库。这两种细胞建立细胞库和各细胞库的各项检定应按《中国生物制品规程》“生物制品生产用动物细胞制备及检定规程”项下的相应要求进行。

　　Vero细胞是由非洲绿猴肾建立的传代细胞系，至170代以后已有明显的致瘤性，一般使用的疫苗生产终末安全代次为160代以前，建议使用Vero细胞研制疫苗的机构应注意该细胞的资料。

　　三、生产工艺研究
　　（一）疫苗原液生产工艺的研究
　　1．生产工艺的主要技术参数
　　（1）病毒与细胞的接种比例，MOI的最佳参数。
　　（2）细胞培养和病毒培养的最佳温度、培养时间和收获时间。
　　（3）病毒液的收获
　　鉴于Vero作培养基质时，后续纯化工艺去除细胞DNA时的困难，因此建议不作细胞冻化以提高病毒收获的做法。
　　（4）灭活或裂解条件及灭活效果的验证
　　鉴于SARS病毒的强感染和强传播特性，灭活剂的选择和灭活效果的验证尤为重要，建议如下：

　　·灭活剂
　　根据其他疫苗的灭活经验，一般情况下可采用甲醛、β-丙内酯或其他有效的灭活剂，如选择甲醛，其浓度、灭活的作用时间、作用温度、pH等条件对疫苗的抗原的活性具有较大的影
响，在研究中应引起注意；
　　如用β-丙内酯应使用95%以上浓度的新试剂，β-丙内酯保存时间过长引起自身聚合，影响灭活效果。β-丙内酯由于能在疫苗液体中完全水解，不必考虑在成品疫苗中的残留，因此可考虑在纯化前低剂量预灭活一次，提高生产工序时的安全性，在纯化后再灭活一次以确保完全灭活。

　　·灭活效果的验证
　　提供病毒灭活验证的详细资料。可采用敏感细胞Vero E6盲传3代，每代用直接免疫荧光验证无活病毒。
　　（5）病毒液的浓缩和/或活性抗原的提取纯化，可考虑用膜过滤法浓缩和柱层析法或区带离心法纯化或其他有效方法。建议参照其他纯化疫苗的要求，对疫苗的总蛋白含量进行控制。
　　（6）佐剂
　　目前能用于疫苗的佐剂仅为铝佐剂，而铝佐剂通常使疫苗产生的抗体滞后，且增加注射局部的副反应机率。如疫苗的抗原量能满足免疫的需要，建议不加佐剂。

　　2．灭活疫苗的安全性（免疫感染增强作用）
　　鉴于呼吸道病毒感染的疫苗预防（麻疹病毒、呼吸道合胞病毒等）易产生灭活疫苗导致免疫感染增强的病理反应，因此，本灭活疫苗须排除免疫感染增强作用的潜在危险，为本灭活疫苗的研究、实验和今后的安全使用提供依据。

　　但是目前没有明确的实验动物模型可以验证有无免疫感染增强作用，为此建议：可用猴体接种灭活疫苗后再攻击SARS病毒，一定时间后测定猴体是否产生病毒血症、脏器是否减少或无病毒抗原、以及作组织病理学和免疫病理学等检查，可以得到初步的证据。另外也可考虑用家兔、小鼠等别的动物进行免疫感染增强作用的初步验证。

　　四、生产的安全性问题
　　鉴于SARS病毒的强传播和强感染性的生物学特性，生产工艺应严格按活病毒和灭活后两部分分开进行，活病毒操作区必须在P3以上生物安全条件下进行，严格执行国家的有关规定。

　　五、其他
　　1．按我国《药品注册管理办法》中预防用生物制品的技术要求完成相关的研究。
　　2．本技术要点将根据对SARS研究的进展情况适时进行修订。

附件2：
　　　　　　　　　细胞模型筛选抗SARS病毒药物试验技术要求

　　新近发现的非典型肺炎的病原SARS病毒，目前尚没有理想的动物模型可用于对抗SARS病毒药物的筛选。为此用细胞模型筛选研究抗SARS病毒的药物，对评价药物抗病毒活性或效果具有重要提示价值。为规范细胞模型抗SARS病毒药物的筛选研究，制定本技术要求。

　　本技术要求适用于化药、中药、生物制品等拟用于SARS治疗或预防药物（不包括预防用疫苗），并将根据SARS病毒学研究的进展适时修订。

　　一、试验材料要求
　　（一）病毒
　　1．毒株：应采用SARS流行期临床分离且经相关部门确证的SARS病毒毒株（建议选用2-3株）。
　　2．毒种库：试验前将病毒先在敏感细胞上传数代，增加毒力，待毒力稳定后，收获病毒分装一定数量的小管，在-80℃低温冰箱或液氮冷冻保存备用。
　　3．检定：毒种库毒种须经外源因子检测合格后方可用于筛选试验，每次试验取一支，不得回冻再用于筛选。

　　（二）细胞
　　1．细胞株：选用对SARS病毒敏感的传代细胞株，如Vero E6、2BS细胞等。
　　2．细胞库：收集大量培养的细胞分管液氮冻存以保留足够的
传代细胞。试验前先复苏细胞传数代，使培养细胞生长旺盛稳定后，
开始接种细胞培养板进行试验。
　　3．检定：细胞库细胞须经外源因子检测合格后方可用于筛选试验，每次试验取一支，不得回冻再用于筛选。

　　（三）待测药物
　　试验前编号登记、标明药名、来源、批号、重量或体积、溶媒、溶解度、稳定性和保存条件等。

　　（四）其他
　　本试验研究必须在生物安全3级试验室进行，毒种的管理使用必须符合国家的有关规定。

　　二、筛选试验
　　（一）预备试验
　　1．病毒毒力测定
　　选择敏感细胞用于病毒培养，加入10倍系列稀释的5-7个浓度的病毒培养液。适宜条件下培养后每天用倒置显微镜观察细胞病变（CPE）或用MTT染色法观察细胞存活状态，用Reed-Muench法计算病毒半数感染剂量（TCID50），每浓度设4个复孔，重复实验确定毒力。
　　2．药物对细胞毒性的测定
　　以细胞病变或MTT染色法为观察指标，前法可观察3-5天，每个药物至少设4个浓度进行测定，用Reed-Muench法求出对细胞无毒的最大浓度（TD0）和半数中毒浓度（TD50）。每浓度药液至少3管，重复试验3次。

　　（二）筛选试验
　　经预试验求出病毒的TCID50和药物的TD0后，在SARS病毒的敏感细胞模型上进行抗病毒活性筛选，适宜的培养液及培养条件培养。96孔板，细胞长成单层后，每孔加100μl （100 TCID50左右）病毒感染，吸附2小时后，倾出病毒。然后加入待测药物，只做一个最大无毒浓度（TD0），4个孔。试验设病毒对照、细胞对照及阳性药物对照。以病毒对照孔出现病变达75%以上（即4+时），可终止试验。
　　倒置显微镜观察对细胞的致病变作用（CPE），将给药孔与病毒对照孔进行比较，如最大无毒浓度药物无抑制病毒CPE作用则不继续做，如有抑制作用须进行补充试验。

　　（三）补充试验
　　最大无毒浓度（TD0）的药物如有抗病毒作用，应进行补充筛选试验。模型和培养条件同上。
　　试验设药物试验组、病毒对照组及细胞对照组。每孔加入100TCID50左右病毒感染，吸附2小时，倾出病毒。选用最大无毒浓度（TD0）药液，2倍或者10倍系列稀释的5-7个浓度，每浓度4孔，每孔100μl，分别加入未感染或感染的细胞培养孔内，每天用倒置显微镜观察，记录细胞病变程度。当病毒对照病孔病变达4+时可终止试验，判定药物的效果。试验须重复3次。
　　用CPE法，对各组进行比较。
　　用Reed-Muench法计算半数有效浓度（IC50）及治疗指数（TI）。
　　TI = 半数中毒浓度（TD50）/半数有效浓度（IC50）
　　以上初筛及进一步药效评价方法一般是针对治疗性给药（病毒感染细胞后给药）的药物；若为预防性药物，则建议相应调整给药与感染的顺序（病毒感染前给药，病毒感染时及感染后均应洗去药物），以考察其预防效果。

　　四、结果评价
　　鉴于目前SARS疾病的理想动物模型尚未建立，且体内外药效学结果的相关性尚不明确，体外药效学的试验结果仅是评价药物疗效重要参考指标。在这种情况下,尽量提供更多的反映药物体内外相关性的研究资料将有助于进一步的评价;如在可能的情况下,进行药代动力学研究,考察体内药物浓度能否达到IC50及维持时间等。另外，还应结合受试药物的安全性，对其有效性进行综合评价。

附件3：
　　　　　　　　　　　　SARS诊断试剂生产研制技术要求

　　由于对引发严重急性呼吸道综合症（简称SARS）的病原－新型冠状病毒的研究尚有待进一步深入，诊断试剂的研究仍存在很多不确定因素。为规范SARS诊断试剂的研究，特制订本技术要求。

　　一、基本要求
　　（一）从事SARS体外生物诊断试剂研发的机构应当具有与试验研究项目相适应的人员、场地及设施等条件。
　　（二）SARS病毒的分离、管理、使用及其保藏、运输、处理等必须按照国家有关规定执行。
　　（三）临床研究必须符合GCP的原则及相关的技术要求。

　　二、原材料
　　（一）抗体检测试剂
　　1．抗原：由于对新型冠状病毒的基础研究尚有待深入，为此所用抗原应尽可能选择检测谱广的抗原，如纯化的全病毒抗原。
　　2．抗原来源明确，质量指标必须达到诊断试剂研制用的
要求。
　　3．病毒株须经鉴定并确证。
　　4．其他辅助材料必须符合相关的技术要求。
　　5．包被用全病毒抗原或阳性质控血清须进行灭活验证研究。
　　6．阳性质控血清须进行中和试验验证研究。

　　（二）核酸检测试剂
　　1．引物的设计须符合核酸检测设计的要求。
　　2．靶序列需进行与其他病毒同源性的分析对比研究。
　　3．检测试剂须设定合理的内标和外标。
　　4．试剂须设置抗污染的特定措施。
　　5．扩增产物须进行确证研究。

　　（三）抗原检测试剂
　　1．可采用单克隆或者多克隆抗体的双抗体检测法。
　　2．抗体须经特异性交叉反应测定。

　　三、工艺与生产
　　（一）工艺过程须进行优化试验研究。
　　（二）生产人员须经专业知识培训，了解有关SARS的基本知识。
　　（三）生产车间须符合《药品生产质量管理规范》的要求。

　　四、质量控制
　　（一）应制定严格的原材料质量标准要求，保证批与批间的一致性。
　　（二）应研究制定企业质量标准及参考品，用于对试剂的质量控制。
　　（三）试剂盒须进行成品性能的评价。

　　五、临床研究
　　（一）研究用样品必须有明确、详细的临床资料，包括病程等；样品中须有一定数量的阳转系列标本。
　　（二）须经过至少两家临床研究单位进行临床考核，出具临床考核报告并加盖临床考核单位有效公章。
　　（三）研究用试剂须经中国药品生物制品检定所检定合格后方可用于临床研究。
　　（四）检测时应采用双盲或者单盲，阴性样品和阳性样品须在符合相关规定的检测实验室的实际评价条件下同时进行测定。
　　（五）核酸检测试剂标本如血清或者唾液等，阳性数量分别不少于200份，同一类型阴性样品不少于400份。
　　（六）对酶联免疫诊断试剂，不同类型的阳性、阴性样品均不少于400份。
　　（七）其他方法的SARS诊断试剂，不同类型的阳性、阴性样品的数量均不得少于300份。
　　（八）检测数据的统计学分析，以病程10天划分，不同病程的病例（样本）数应具有统计学意义。

　　六、其他
　　（一）SARS诊断试剂的生产研制必须符合《中华人民共和国传染病防治法》的相关要求。
　　（二）产品使用说明书需明确标注试剂检测的局限性。
　　（三）本技术要求将根据对SARS研究的进展情况适时进行修订。

附件4：
　　　　　　　　　　　　　　　SARS病毒毒株资料登记表

一、病毒株名称：
二、宿主情况：
　- 病人姓名
　- 病人年龄
　- 病人性别
　- 病人民族
　- 病人家庭住址
　- 发病地点
　- 发病日期
　- 收住入院日期
　- 临床确诊日期
　- 实验室确诊日期
　- 病人病程
　- 病人转归　　　　　死亡　　　痊愈　　　是否有后遗症
　- 病人密切接触者病人数
　- 毒株分离原样本：
咽试子　　漱口液　　　痰液　　　血液　　　粪便　　　尸解标本的组织名称
　- 取样日期
　- 取样时病人的病期
　- 取样地点
　- 病人是否留有恢复期血清
如有：采血日期
　　　　　血清量　　　　ml　　　　支
三、毒株分离过程
分离用细胞
　　细胞名称
　　细胞代次
　　细胞来源
　　培养基名称
分离用动物
　　动物名称
　　动物品系
　　动物年龄
　　饲养条件
病毒分离传代
　　样品处理方法
　　首次盲传确证病毒阳性代次
　　病毒确证检定方法
　　每代培养天数
　　细胞是否产生病变
　　　　病变模式（如有请提供照片）
　　病毒滴度
　　滴定方法
四、毒种建立和保存
毒种存储条件　　　-20℃　　　-40℃ 　　　-60℃　　　-80℃
原始毒种代次
分装毒种用容器名称
分装毒种用容器材料
分装毒种用容器体积
毒种病毒滴度
毒种添加的保护剂
　　人白蛋白　　%
　　牛血清　　　%
　　其他保护剂
原始毒种批数量　　　ml　　　支
该株毒种的其他代次
　　数量　　　ml　　　支
如已冻干
　　写明冻干条件
五、毒种的检定
　　毒种的鉴别实验
　　检定方法
　　检定日期
　　检定结果
毒种的无菌试验
　　检定方法
　　检定日期
　　检定结果
　　毒种的序列测定
　　测定方案
　　测定方法
　　测定日期
　　实验室名称
　　测定结果　　附：核酸序列图
　　　　　　　　　　推导的氨基酸序列图
　　　　　　　　　　种系发生树图
六、分离病毒的P3实验室
面积
所在地址
邮政编码
电话
传真
实验室负责人姓名　　　　职称　　　　　职务
E-mail：
手机
上级主管部门
负责人（签章）

下载地址: 点击此处下载

返回跳至顶部

上一篇: 关于转发广东省建委《关于严格办理房地产权抵押登记手续、防止伪造〈房屋所有权证〉诈骗的紧急通知》的通知
下一篇: 文化部办公厅关于查处第三批违法游戏产品等事项的通知

法律资料网 http://law680.infoeach.com

关于印发《SARS病毒灭活疫苗临床前研究技术要点》等技术要求的通知

关于印发《SARS病毒灭活疫苗临床前研究技术要点》等技术要求的通知

国务院办公厅转发农业部等部门关于做好当前减轻农民负担工作意见的通知

劳动部关于颁发《社会保险统计管理规定》的通知

下载排行

推荐文章